腦立體定位儀的實驗內容說明
點擊次數(shù):815 更新時間:2022-07-21
腦立體定位儀又稱腦固定裝置(英文名:stereotaxicapparatus),它是利用顱骨外面的標志或其它參考點所規(guī)定的三度坐標系統(tǒng),來確定皮層下某些神經(jīng)結構的位置,以便在非直視暴露下對其進行定向的刺激、破壞、注藥物、引導電位等研究。
腦立體定位儀的實驗內容說明:
?。?)動物麻醉:小鼠,體重20-30g,稱重后以0.4%腹腔麻醉注射時必須緩慢,隨時注意動物狀態(tài)。
?。?)小鼠頭部固定:將小鼠的門齒固定于腦定位儀上頜固定器,然后把一側的耳捧推入動物的外道后,使動物的頭在處于兩滑道正中。再將另一耳捧推入另一側的外耳道。這時觀察兩個耳棒的刻度一致后,將兩耳棒上的固定螺絲扭緊,在將牙齒固定器上壓鼻環(huán)壓下后扭緊(鼻環(huán)、耳棒的松緊度調節(jié)適宜為好),這時從各個方向推壓動物頭部"均不會出現(xiàn)移動。
?。?)開顱鉆孔前的備皮:剪去動物頭部毛,用2%碘酒及75%酒精棉球作頭部皮膚的消毒,沿矢狀縫作一3cm長的皮膚切口,分離皮下組織,用雙氧水清潔顱骨表面的筋膜及肌肉并剝離,推開骨膜,暴露前囟、人字縫及矢狀縫。
(4)確定標準中線:將金屬定位針向下移動到矢狀縫上方后,再前后移動定位針,使定位針定位到前囟。
?。?)小鼠海馬定位:用定位針在前囟后2mm,矢狀縫旁開2.5mm處定位一點,即為海馬的平面位置,然后在此點上用鉆孔針在顱骨上鉆一小圓孔。
?。?)注射藥物:小鼠海馬則位于該圓孔下2mm,將1ml注射器吸入藥物安置到MC-5微操作儀上,操作儀器使注射器針頭由小鼠腦鉆孔處下降2mm時完成藥物注射到小鼠腦海馬處。
(7)制作腦組織切片:將小鼠腦制作成切片,顯微觀察小鼠腦中紅染料位置來驗證小鼠腦海馬中是否定位準確。